Калькулятор концентрации белка (A280)
Рассчитайте концентрацию белка по поглощению при 280 нм с использованием закона Бугера-Ламберта-Бера и коэффициента экстинкции белка.
Как использовать калькулятор концентрации белка
- Измерьте поглощение образца белка при 280 нм.
- Введите значение A280.
- Введите коэффициент разведения образца.
- Введите коэффициент экстинкции для вашего белка (мл·мг⁻¹·см⁻¹).
- Нажмите «Рассчитать», чтобы получить концентрацию белка.
Примеры использования
- •Количественная оценка очищенных рекомбинантных белков после хроматографии.
- •Определение концентрации антител для терапевтических составов.
- •Мониторинг восстановления белка на этапах очистки.
Формула
Формула: концентрация (мг/мл) = A280 × коэффициент разведения / коэффициент экстинкции (мл·мг⁻¹·см⁻¹).
Часто задаваемые вопросы
Какой коэффициент экстинкции следует использовать?
Молярный коэффициент экстинкции специфичен для каждого белка и зависит от содержания триптофана, тирозина и цистеина. Для антител IgG обычно используется значение 1,4 мл·мг⁻¹·см⁻¹. Используйте ExPASy ProtParam для расчёта по аминокислотной последовательности.
Когда измерение A280 предпочтительнее метода Брэдфорда/БКА?
Измерение A280 неразрушающее, быстрое и не расходует образец. Однако загрязнение нуклеиновыми кислотами (A260) и другие УФ-поглощающие соединения могут вызывать помехи.
Отказ от ответственности
Только для образовательных и лабораторных целей. Точность зависит от использования правильного коэффициента экстинкции для конкретного белка и длины оптического пути кюветы 1 см.